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非无菌产品微生物限度检查(一)

点击次数:340  发布时间:2016-03-25

微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温**和**的计数。

当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合规定的微生物限度标准时,应按下述规定进行检验,包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外,本法不适用于活菌制剂的检查。

本检查法可采用替代的微生物检查法,包括自动检测方法,但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法。

微生物计数试验应在受控洁净环境下的局部洁净度不低于B 级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作,防止再污染,防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。

如供试品有**活性,应尽可能去除或中和。供试品检查时, 若使用了中和剂或灭活剂,应确认其有效性及对微生物无毒性。

供试液制备时如果使用了表面活性剂,应确认其对微生物无毒性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。

计数方法

计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和*可能数法(Most-Probable-NumberMethod,简称MPN 法)。MPN 法用于微生物计数时**度较差,但对于某些微生物污染量很小的供试品,MPN 法可能是更适合的方法。

供试品检查时, 应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法,所选的方法必须具备检测充足样品量的能力,以保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。

计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验

供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。

供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验,以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。

若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时,计数方法应重新进行适用性试验。

表1 试验菌液的制备和使用

 

试验菌株

试验菌液的制备

计数培养基适用性检查

计数方法适用性试验

需氧菌总数

计数

霉菌和酵母

菌总数计数

需氧菌总数

计数

霉菌和酵母

菌总数计数

金黄色葡萄球菌

(Staphylococcus

aureus)

CMCC(B)26 003)

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养,培养温度3035℃,培养时间1824小时

胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆胨液体培养基,培养温度30~35℃,培养时间不超过3 天,接种量不大于100cfu


胰酪大豆胨琼脂培养基/胰酪大豆胨液体培养基(MPN 法),培养温度3035℃,培养时间不超过3 天,接种量不大于100cfu


铜绿假单胞菌

Pseudomonas

aeruginosa

CMCCB10 104

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基,培养温度3035℃,培养时间1824小时

胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆胨液体培养基,培养温度3035℃,培养时间不超过3天,接种量不大于100cfu


胰酪大豆胨琼脂培养基/胰酪大豆胨液体培养基(MPN 法),培养温度3035℃,培养时间不超过3 天,接种量不大于100cfu


枯草芽孢杆菌

(Bacillus

subtilis)

CMCC(B) 63 501

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基,培养温度3035℃,培养时间1824小时

胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆胨液体培养基,培养温度3035℃,培养时间不超过3天,接种量不大于100cfu


胰酪大豆胨琼脂培养基/ 胰酪大豆胨液体培养基(MPN法),培养温度3035℃,培养时间不超过3 天,接种量不大于100cfu


白色***

(Candida

albicans)

CMCC(F) 98 001

沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养基,培养温度2025℃,培养时间23

胰酪大豆胨

琼脂培养基,

培养温度3035℃,培养时间不超5 天,接种量不大于100cfu

沙氏葡萄糖琼脂培养基,培养温度 20~ 25℃,培养时间不超过5天,接种量不大于100cfu

胰酪大豆胨琼脂培养基MPN 法不适用),培养温度3035℃,培养时间不超过5 天,接种量不大于100cfu

沙氏葡萄糖琼脂培养基,培养温度 20 25℃,培养时间不超过5天,接种量不大于100cfu

黑曲霉

(Aspergillus niger)

CMCC(F) 98 003

沙氏葡萄糖琼脂培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基,培养温度2025℃,培养时间57天,或直到获得丰富的孢子

胰酪大豆胨琼脂培养基,培养温度3035℃,培

养时间不超

5 天,接种量不大于100cfu

沙氏葡萄糖琼脂培养基,培养温度 20 25℃,培养时间不超过5天,接种量不大于100cfu

胰酪大豆胨琼脂培养(MPN 法不适用),培养温度3035℃,培养时间不超过5 天,接种量不大于100cfu

沙氏葡萄糖琼脂培养基,培养温度 2025℃,培养时间不超过5天,接种量不大于100cfu

注:当需用玫瑰红钠琼脂培养基测定霉菌和酵母菌总数时,应进行培养基适用性检查,检查方法同沙氏葡萄糖琼脂培养基。